PCR & qPCR
聚合酶链反应
聚合酶链反应(PCR = 聚合酶链反应)是一种酶依赖性过程,可体外复制遗传物质 (DNA)。其中包括变性、加成和延伸三个步骤。PCR 几乎可以算得上是所有生命科学实验室的标准方法。它的应用范围很广,如 DNA 克隆、遗传性或传染性疾病诊断、基因功能分析、亲子鉴定或法医分析等。
因此,不断开发出更新、更灵敏的派生型。其中最重要的派生型是 qPCR(定量 PCR)。该方法提供了有关扩增 DNA 数量的信息。<br/>BRAND 为极为注重质量和纯度的 PCR 和 qPCR 严苛应用提供无尘室品质的 PCR 耗材。我们对经过验证的 ISO 8 等级的洁净室进行生命监测,并且高度自动化,确保了 BRAND 的 PCR 产品的纯度。独立的 ISO 17 025 认证实验室就我们的 PCR 产品是否含有 DNA、DNase、RNase 和内毒素/热原等进行检测。
更多信息请参见下面的 BIO-CERT® 质量等级章节。
BRAND 的 BIO-CERT® 产品达到高水平质量标准,并且根据具体应用提供质量水平。除了常规认证质量标签外,还提供 PCR、细胞培养和液体处理的特殊质量等级。因此,您可以快速、轻松地找到适合您应用的 BIO-CERT® 产品。
正确的引物、试剂、最佳退火温度和各个 PCR 步骤的理想持续时间——这些是每个用户在进行 PCR 时必须满足的要求。能够稳定地进行 PCR 反应、在随后的常规流程中未出现麻烦,这是完美方法的重要因素。必须进行大量的前期试验,检查各种参数对各个 PCR 的影响。
BRAND 提供多种 PCR 单一容器和 PCR 条。有了该产品,即使是少量
的样品也可以实现优化而经济的工作。
BRAND 所出品 PCR 单个容器的容量为 0.2 和 0.5 ml,是中小样品量的高效解决方案。超薄壁和均匀的容器可以保证 PCR 过程中实现最佳温度传递效果,最佳封闭效果能可靠地防止蒸发。这样,即使试样容积小,也可以取得有说服力的结果。
如果是中型试样处理量,那么尺寸为 8 和 12 的 PCR 带是 PCR 或 qPCR 的灵活解决方案。您可以选择:针对因热循环仪盖子所产生极高压力的拱形盖子,或者用于 qPCR 的扁平盖子。可用手方便地打开和关闭悬挂的盖条,这时自动化装置中单独的盖条和薄膜条会显示其厚度,因为盖子无法阻碍机械手。
随着不断开发出新的 PCR 方法,所进行的检测数量也在稳步增长。PCR 在许多领域都是标准流程。除了中等样品量之外,高流量应用也越来越重要,以便于节省时间和成本。为了应对不断增长的样品量,简单而安全的移液必不可少。不断追求流程优化、降低材料和试剂的消耗。
凭借 PCR 板领域广泛的产品组合,BRAND 为高流量分析提供了理想的耗材。超薄的壁厚、可以避免相互影响光滑的表面、不同的颜色和形状,这些是覆盖广泛的应用和设备的理想先决条件。凭借标准化的 ANSI/SLAS 格式,确保可在所有普通旋流器中使用。
标准型还是低矮型?
无框、半框、全框
BRAND 为您提供诸如 Applied Biosystems®、Biorad® 或 Peqlab® 之类知名品牌所有常见热循环仪的适用耗材。我们的兼容性表格让您一目了然地看到哪些 BRAND PCR 耗材适合您的热循环仪。
根据需要,我们使用单独的条型码编码您的 PCR 板,比如使用代码 39(默认)、矩阵码或交错式 2of5 码。这样,由于可自动跟踪试样,实验室中的流程效率变得更高。为使用我们的服务,请先填写在线表格: www.brand.de/barcode.
对样品进行安全密封,这是 PCR 期间和在之后的测量期间避免脏污和蒸发必不可少的条件。必须选择适合所执行的 PCR 测试类型和所使用的 PCR 容器的密封方法。例如,为了在实时 PCR 中可靠确定数值,需要使用高度透明的薄膜,因为直接在循环器中进行测量。
除了选择正确的密封方法外,移液也是有效保护样品的重要环节。无论是铝箔还是盖条:BRAND 为各种应用提供最佳的密封方法。即使是超小样品量,也有安全而方便的密封方法。
使用 PCR 盖条可靠地密封 24、48 和 96 孔 PCR 条和板,有效防止试样蒸发和污染。
无论是标准 PCR、qPCR 还是 Digital Droplet PCR,任何情况下原材料的选材都精细考究,且体积较小。为了保护样品并同时还保持其敏感性,必须最佳地封闭 PCR。
样品量越小,就越能避免蒸发损耗。由于有多种薄膜和密封条可供选择,您始终可以找到一套完美适用的系统,来安全地密封您的 PCR 板和容器。我方应用备注中提供了更多信息。
无论是用于记录测试的 PCR 单个容器,还是用 96 孔或 384 孔板进行标准化过程高通量试验:选择合适的耗材可以为您节省时间和金钱,同时最大限度地减少浪费。了解更多关于我们各种耗材的信息。
BRAND 提供的白色 PCR 产品在 qPCR 中比其他透明管具有更好的效果。再加上有光滑表面,白色底色能最佳地反射荧光信号。
我们的 PCR 架适用于样品制备、0.2 ml 单个容器、8 孔或 12 孔板以及 96 孔 PCR 板。合适的冷却器 PCR 在 4 °C 下大约能将样品保温 3 小时。分离胶在 7 °C 时从紫色变为粉红色。
较高温度下进行孵化时,我们建议使用带盖锁的反应容器,以防止容器弹开。
注意: 相对离心加速度 (RZB) 取决于转子的半径和离心机的转速 (rpm)!
G 数字:重力加速度
RZB: 相对离心加速度
(对应 g 数字)
r:转子半径
rpm。 转子每分钟转数(转速)
我们不建议对反应容器进行高压灭菌处理。高压灭菌器可能是一次性产品的污染源。
PP 的优点
不建议将该反应容器用于长期存放。为此,我们推荐带螺旋帽或低温管的反应容器。
缩写 "q!PCR " 标识可用于定量实时 PCR 的 PCR 一次性用品。这些用品是白色和/或高度透明的产品,适用于实时循环器中荧光信号的敏感检测。
BRAND 提供 PCR 单个容器和条,有圆顶和平盖两种可供客户选择。PCR 板可以用自粘性密封膜或用 TPE 或硅胶材质的密封垫进行密封。
否。定量实时 PCR 过程中产生的荧光信号只能通过扁平、高度透明的盖子来检测。适用于定量实时 PCR 应用的 BRAND PCR 产品在销售文件中标有缩写 q!PCR。
不,不能高压灭菌。
PCR 一次性用品是在最先进的洁净室条件下、由高质量的纯聚丙烯制造而成,不添加任何添加剂,并自动包装。独立的实验室会定期检查产品是否含 DNA、RNase 和 DNase。
PCR 一次性用品由 PP 材质制成。实际上,PP 可以在 121°C(2 bar,符合 DIN EN 285)的高压釜中进行蒸汽灭菌处理。但由于壁很薄,而且高压灭菌器可能是污染源,我们不建议对该产品组采用这种灭菌方式。
对实时 PCR 应用而言,BRAND 新的白色 PCR 产品系列比透明的 8 孔条或板的效果明显更好。该系列的不同产品均采用 Ti02(二氧化钛)均匀上色,从而可以与光滑的表面结合,高效地反射荧光信号。